メスシリンダーに5xTBEを10ml注ぎ、純水(DW)を加えて全量を100mlにする。
ゲル作成トレイとコームをDW水でリンスしてから、セットする。
アガロース1.2gを秤量して200mlの三角フラスコに入れ、100mlの0.5xTBEを加えてよく撹拌する。
エチジウムブロマイド溶液1マイクロリットルを三角フラスコに加える。エチジウムブロマイド溶液の入った瓶を倒さないように。使用したチップは流水でていねいに洗ってください。
三角フラスコの口に軽くラップをかけて、三角フラスコを電子レンジで2ー3分加熱して、完全に溶かす。
ゲルが60度くらいに冷えたらゲル作成トレイに静かに流し込む。コームの部分に泡がつかないように注意する。
メスシリンダーに5xTBEを40ml注ぎ、純水(DW)を加えて全量を400mlにする。
タンクをDW水で洗浄する。
ゲルが固まったらコームをはずし、余計なゲルを拭き取って、ミューピッドにセットする。
すぐに0.5xTBEをゲル面が完全に隠れるくらいまで注ぐ。この時に、コームの穴の中のゲルかすをTBEの勢いで掃除するように。
マイクロピペット(20P)とピペットチップ、DNAサンプルとマーカー(ラムダHindIII)、ブルージュース(ゲルローディングバッファー)を用意する。
左端のゲルの穴にマーカー(1Kbpラダー)を5マイクロ入れる。
1.5mlチューブに、ブルージュースをサンプルの数だけ2マイクロずつラップの上に分注する。
DNAサンプルを5マイクロずつブルージュースに加えやさしくピペッティングする。マイクロピペットの目盛を7.5マイクロにして、チューブのサンプルを全量吸い上げて、ゲルの穴に注入する。サンプルごとにピペットチップを換えること。
配線をして、100Vにセットし、スタートボタンを押す。
メスシリンダーを水洗いしてから、DWでリンスして、乾熱滅菌する。
３０分程度、泳働してからスイッチを切る。
ゲル作成トレイや泳働漕、コームなどはよく水洗いしてDW水でリンスしてから、乾燥機で乾燥させる。マイクロピペットなどは元の場所にかたづける。
トレイの上にゲルを載せ、ゲルドキュメンテーション装置のスイッチを入れて、
位置とピント、明るさなどを調節して、写真を撮る。
スイッチを消し、ゲルは元の容器に移し、
トレイはきれいに水洗いをして立てておく。
エチジウムブロマイドを含むゲルは冷蔵庫で保存し、まとめて処理する。
エチジウムブロマイドに触れたディスポーザブルグローブは危険物ゴミとして捨てる。
最終更新年月日 2013年4月10日